1. 杂质的来源：（1）药物生产过程中引入，（2）药物贮存过程中产生

2. 杂质限量：在不影响药物疗效、稳定性及不发生毒性的前提下，药物中所含杂质的最大允许量。

3. 杂质检查方法(限量检查法)：

（1）对照法

取限度量的待检杂质的对照品配成的对照溶液，与一定量供试品配成的供试品容液在相同条件下处理，比较反应结果，判断供试液中所含杂质限度是否符合规定。

杂质限量的计算：杂质限量=允许杂质存在最大量*100%/供试品量=标准溶液的浓度×标准溶液的体积×100%/供试品的量，

杂质限量=L=C*V*100%/S，L杂质限量，C标准溶液的浓度，V标准溶液的体积，S供试品的量。

（2）灵敏度法

在供试品溶液中加入试剂,在试验条件下反应,不得出现正反应. 即以检测条件下反应灵敏度控制杂质限量。

（3）比较法 

取一定量供试品,在规定条件下测定待检杂质吸光度或旋光度等指标，与规定限量比较，  判断供试品中杂质限量。

4. 氯化物检查法：

氯化物检查法是利用氯化物在硝酸酸性溶液中与硝酸银试液作用，生成氯化银的白色浑浊液，与一定量标准氯化钠溶液在相同条件下生成的氯化银浑浊液比较，以判断供试品中的氯化物是否超过了限量。氯化物杂质检查中使用的显色剂是硝酸银，用标准氯化钠溶液做对照，加入稀硝酸来排除其他离子干扰。检查在硝酸酸性溶液中进行。加入硝酸可避免弱酸银盐(如碳酸银、磷酸银以及氧化银)沉淀的形成而干扰检查，同时还可加速氯化银沉淀的生成并产生较好的乳浊。

标准NaCl溶液的浓度： 10 mg Cl-/ml，50 ml溶液中含50～80 mg的Cl-所显浑浊梯度明显，相当于标准NaCl溶液5～8 ml。 

硝酸酸性条件：以50ml供试溶液中含稀硝酸10ml为宜。

避光、暗处放置5分钟后比浊，因氯化银见光易分解。

注意事项：

（1）平行操作原则 

（2）供试液和对照液稀释后，再加硝酸银溶液。

（3）供试品溶液不澄清处理方法

（4）供试品溶液有色时的处理方法：内消色和外消色

（5）供试品溶液显碱性的处理方法

（6）当有其它干扰物质存在时，必需在检查前除去（Br- 、I-、CNS-、S2-）

（7）比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下观察。

5．硫酸盐检查法

利用微量的硫酸盐在稀盐酸酸性条件下与氯化钡反应，生成硫酸钡微粒显白色浑浊，与一定量标准硫酸钾溶液在相同条件下产生的硫酸钡浑浊程度比较，判定供试品硫酸盐是否符合限量规定。

标准K2SO4溶液的浓度：0.1mg/ml，50ml溶液中含0.1～0.5mg的所显浑浊梯度明显，相当于标准K2SO4溶液1～5ml。 

盐酸酸性条件：以50ml供试溶液中含稀盐酸2ml为宜。可排除干扰（CO32-、PO43-、C2O42-、SO32-）

6．铁盐检查法(硫氰酸盐法) 检查Fe2+和Fe3+

铁盐在盐酸酸性溶液中与硫氰酸铵生成红色可溶性硫氰酸铁配位离子，与一定量标准铁溶液用同法处理后所显的颜色进行比较。

用FeNH4(SO4)2·12H2O（硫酸铁铵）配制标准铁贮备液（加入硫酸防止Fe3+的水解）   

盐酸酸性条件：以50ml供试溶液中含稀盐酸4ml为宜。

反应中加入的硫氰酸铵量较大，这是因为铁盐与硫氰酸根离子的反应为可逆反应，加入过量的硫氰酸铵，不仅可以增加生成的配位离子的稳定性．提高反应灵敏度，还能消除氯化物等与铁盐生成配位化合物所引起的干扰。

反应中加入过硫酸铵将Fe2+氧化为Fe3+，且同时可防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色；

也可加硝酸后加热（氧化Fe2+为Fe3+）

比色方法：同置于白色背景上，自上向下观察。 

7．重金属检查法 （ 以铅为代表）

重金属是指在实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠作用呈色的金属，如：Ag、Pb、Hg、Cu、Cd、Bi、Sb、Sn、As、Ni、Co、Zn等，铅易在体内积蓄中毒,以Pb为代表

重金属测定法中国药典共收载四法 

第一法:硫代乙酰胺法  适用于溶于水、稀酸、乙醇的药物,是最常用的方法。

第二法:炽灼后检查法 适用于含芳环、杂环以及不溶于水、稀酸及乙醇的有机药物。

第三法:硫化钠法  适用于难溶于稀酸但能溶于碱性溶液药物(巴比妥类、磺胺类)。

第四法:微孔滤膜法  适用于重金属限量低(2-5mg)药物. 

硫代乙酰胺法

除另有规定外，取25ml纳氏比色管三支，甲管中加标准铅溶液一定量与醋酸盐缓冲液(pH3.5)2ml后，加水或该药品项下规定的溶剂稀释成25ml，乙管中加入按各品种项下规定的方法制成的供试液25ml，丙管中加入与乙管相同量的供试品，加配制供试品溶液的的溶剂适量使溶解，再加与甲管相同量的标准铅溶液与醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml后，用溶剂稀释成25ml，若供试液带颜色，可在甲管中滴加少量的稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液,使之与乙管、丙管一致；再在甲、乙、丙三管中分别加硫代乙酰胺试液各2ml，摇匀，放置2分钟，同置白纸上，自上向下透视，当丙管中显出的颜色不浅于甲管时，乙管中显示的颜色与甲管比较，不得更深，如丙管中显出的颜色浅于甲管，应取样按第二法检查。

供试品如有色，需经处理后方可检查。 

A. 外消色法：在对照管中加稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液。

B.  内消色法 ——与氯化物检查时的处理方法类似

C. 改用第四法，微孔滤膜过滤法

若供试品中有微量Fe3+存在，会氧化硫化氢生成单质硫，干扰比色，加入抗坏血酸或盐酸羟胺（0.5～1.0g）还原Fe3+为Fe2+，可消除干扰。

第二法  炽灼残渣法：500～600℃炽灼后的残渣，经处理后，依一法检查。 

第三法  硫化钠法：NaOH碱性条件下，用硫化钠作显色剂

第四法  微孔滤膜法 适用于含2～5mg重金属杂质及有色供试液的检查。依一法检查，结果微孔滤膜过滤后比较色斑。 同第一法使重金属生成的硫化物富集于微孔滤膜上(铅斑)提高检查的灵敏度. 

9．砷盐检查法 （包括：AsO43-，As3+）

中国药典收载二法。（重点第一法）

第一法：古蔡氏法

第二法：二乙基二硫代氨基甲酸银法(Ag-DDC法)

第一法：古蔡氏法

锌与盐酸作用产生的新生态氢与供试品中微量砷盐化合物反应生成挥发性砷化氢，再与溴化汞试纸作用生成黄色或棕黄色砷斑。比较同一条件下供试品与标准砷溶液所显砷斑的颜色深浅，测得供试品的含砷限度。

试剂的作用

1）KI的作用——还原剂：As5+→As3+

五价砷生成AsH3的反应速度比三价砷速度慢, 加入 KI 使五价砷还原为三价砷后再与活泼氢反应,  以增大AsH3的生成速度.

2）酸性SnCl2的作用——还原剂(表现在3方面)

Ⅰ. 将五价砷还原为三价砷(As5+→As3+)

Ⅱ.  将KI被氧化生成的I2再还原为I-

Ⅲ.  SnCl2与Zn粒表面形成Zn-Sn齐：起去极化作用,使氢气均匀而连续地发生.

3）PbAc2棉花的作用——排除硫化物的干扰

4）HgBr2试纸的作用——与AsH3作用生成砷斑

排除方法：加入浓硝酸处理

第二法：二乙基二硫代氨基甲酸银法(Ag-DDC法)

本法不仅用于砷盐的限量检查，而且可用作微量砷盐的含量测定.

原理：第一步：同古蔡氏法生成砷化氢， 第二步：砷化氢还原Ag-DDC溶液,产生红色的胶态银，用目视比色法或在510 nm测定吸收度进行比较。 

10．干燥失重测定法 

干燥失重是指药物在规定条件下经干燥后所减失的重量，主要是水分，也包括其它挥发性物质。

常用的干燥方法： 

（1）常压恒温干燥法 

适用于受热较稳定的药物。干燥温度一般为105℃。 

干燥失重：第二次及以后各次称重均应在规定条件下继续干燥1 h后进行。 

炽灼残渣：第二次及以后各次称重均应在规定条件下继续炽灼0.5 h后进行。 

（2）干燥剂干燥法

适用于受热易分解或挥发的供试品。干燥剂：硅胶、浓硫酸、五氧化二磷（P2O5 ）。

（3）减压干燥法 

适用于熔点低，受热不稳定或水分难赶除的药物。 除另有规定外，压力应在2.67kPa（20mmHg）以下。

11．炽灼残渣检查法

检查不含金属的有机药物或挥发性无机药物中混入的无机杂质(金属氧化物或无机盐类)。 取供试品1.0～2.0 g，置已炽灼至恒重的坩埚中，精密称定，缓缓炽灼至完全炭化，放冷；加硫酸0.5～1 ml使湿润，低温加热至硫酸蒸气除尽后，在700~800℃炽灼至恒重，即得。限量一般为0.1%～0.2%        

 注意事项 

（1）若残渣需留作重金属检查，则500～600℃炽灼至恒重。 

（2）加硫酸处理是使杂质转化为稳定的硫酸盐，并帮助有机物炭化

12．易炭化物检查法（对照法）

易炭化物：指药物中夹杂的遇硫酸易炭化或易氧化而呈色的微量有机杂质。

13．溶液颜色检查法

溶液颜色检查是控制药物生产过程中或贮存过程中产生有色杂质限量的方法。

《中国药典》方法：目视比色法、分光光度法、色差计法

（1）目视比色法

取一定量供试品，加水溶解，置纳氏比色管中，加水稀释至10ml，溶液呈现的颜色与规定色调色号的标准比色液比较，不得更深。色泽较浅时，在白背景上自上而下透视；色泽较深时，白背景前平视观察。 

（2）分光光度法

按规定测定供试液的吸收度，不得超过规定值。

（3）色差计法

用仪器测定供试液与标准液之间的色差，不得超过规定的色差值。

14．澄清度检查法

澄清度测定：是检查药品溶液中的不溶性杂质。检查方法是在室温条件下，将用水稀释至一定浓度的供试品溶液与等量的浊度标准液分别置于配对的比浊用玻璃管中，在暗室内垂直向置于伞棚灯下，照度为1000 lx，从水平方向观察、比较，用以检查溶液的澄清度或浑浊程度。

用硫酸肼溶液和乌洛托品(六亚甲基四胺)溶液等体积混合，配制成浊度标准贮备液。取浊度标准贮备液加水稀释配制成浊度标准原液。浊度标准原液应在配制后48小时内使用。临用时取浊度标准原液适量，加水稀释制成不同级号的浊度标准液。供试管的澄清度与所用溶剂相同或未超过0.5级浊度标准时称为澄清

15．酸碱度检查法

(1) 指示剂法

取一定量指示液,以pH值的变色范围作为酸碱性杂质的限度指标.

a →甲基红指示液2滴(pH4.2-6.3, 红-黄),不得显红色;

b →溴麝香草酚蓝指示液5滴(pH6.0-7.6,黄-蓝), 不得显蓝色.

(2) 酸碱滴定法

在一定指示液下,用酸或碱滴定供试品中碱性或酸性杂质,以消耗滴定液的ml数作为限度指标。

(3) pH值测定法

用电位法测定供试品溶液的pH值.

16．特殊杂质：是指在该药物生产和储藏过程中,根据其生产方法、工艺条件及药物本身结构性质可能引入的特有杂质.阿司匹林→水杨酸， 盐酸普鲁卡因→对氨基苯甲酸

特殊杂质的检查主要是利用药物与杂质的差异进行检查，如：物理性质的差异、化学性质的差异、光学性质的差异、色谱性质的差异等。

17．旋光法检查阿托品中莨菪碱

18．分光光度法检查肾上腺素中肾上腺酮，葡萄糖注射液中5-羟甲基糠醛。

19．色谱法

（1） 薄层色谱法(TLC)

1）杂质对照品法——适用于杂质已知并有杂质对照品的情况

方法  根据杂质限量, 取供试品溶液和一定浓度的杂质对照品溶液,分别点

于同一薄层板上展开,定位后进行检查。

例：盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查，

2）供试品自身对照法——适用于杂质的结构不能确定或无杂质对照品的情况.

例：氢化可的松中“其他甾体” 检查

供试液:3mg/ml

对照液:60mg/ml(供试液稀释50倍)

判断:供试液的杂质斑点数不得多于3个，且供试液的杂质斑点颜色不得比对照液主斑点颜色更深。

（2）高效液相色谱法

1）面积归一化法

2）主成分自身对照法——适用于杂质的结构不能确定或无杂质对照品的情况

    供试品色谱中显示的杂质峰数不得超过1个或数个；各杂质峰面积及其总和不得大于对照品色谱中主峰面积的一定分数。

3）内标法测定供试品中杂质的总量限度